三、传染病诊断家兔传染病是兔病中最重要而给养兔业带来损失最大的疫病，必须尽可能早期诊断，为预防治疗提供依据，在非疫区作好预防为主的工作，在疫区做到“早、快、严、小”尽可能减少家兔死亡，降低损失，达到消灭传染病的目的。为了正确诊断，必须采取各种检查疫病的方法，如流行病学、临床、微生物学及免疫学等诊断方法，也可根据传染病不同特点，采用上述某些方法或综合应用各种方法。流行病学诊断：通过访问、调查，搜集有关资料进行分析研究，帮助传染病的确诊，可从以下几方面进行：1?发病家兔地区有哪些传染病，最早发病时间、地点、季节，传播速度及蔓延情况，发病兔年龄、性别，品种及其感染率、发病率和死亡率。2?应从家兔饲养管理，饲料配方调制方法及卫生条件及临近地区无有疫情发生。3?传染病发生经过、发病前预防注射过哪些疫（菌）苗以及发病后治疗情况。临床症状，剖解所见的病理变化及经过治疗的效果。发病区域的地形、气候、昆虫及野生动物等与疫病发生的关系。临床诊断：是诊断疫病的最基本方法，通过对疫病发生的了解，实地观察及对病、死兔剖检和测温等方法进行一般检查，另外要对疫病进行类症鉴别及疗效验证均十分重要。病理解剖学诊断：每一种传染病均会有其特殊病痕，很多疾病通过尸体剖解可以了解体内各种器官的病理形态学的变化，如兔病毒性出血症（兔瘟）有肺出血等变化，巴氏杆菌病也有肺出血，所以要进行区别诊断。微生物学诊断：这是查清病原体的重要手段。1?细菌性疾病采取有病变的内脏器官，如心脏、肝、脾、肾、空肠、回肠、淋巴结等作为被检病料。染色与镜检：取清洁玻片作被检病料的触片或涂片，自然干燥后，火焰固定，用革兰氏、美蓝或姬姆萨染液染色，待干后镜检。由于不同致病菌染色结果不一样，如A型魏氏梭菌呈革兰氏阳性大杆菌，较少能看到芽胞；巴氏杆菌呈革兰氏阴性菌，大小一致的卵圆形小杆菌。分离培养：用不同的培养基如绵羊鲜血琼脂、血清琼脂等培养基，于37℃温箱培养20-24小时，再取其典型菌落接种马丁肉汤培养基，培养20-24小时，再作涂片检查及测生化反应，动物接种和血清学检验等。动物接种：可以取被子检兔的脏器磨细用灭菌生理盐水作1：5或1：10稀释，也可以用分离培养菌落接种的马丁肉汤作为接种材料。一般以皮下、肌肉、腹腔、静脉或滴鼻接种家兔或小白鼠，剂量：兔0.5毫升为宜，小白鼠0.2毫升即可。若接种后兔或小白鼠发病或死亡，有典型的病理变化即可确诊。血清学检验：其目的在于应用血清学方法对兔群进行普查诊断。方法有试管法和玻片法。试管法：将待检血清作成不同稀释度，分别加入等量诊断抗原，摇匀后放置于37℃温箱或室温2-3小时观察，凝集价在1：40以上者为阳性反应。玻片法：取被硷血清0.1毫升加于玻片上，同时加入等量诊断抗原，于15-20℃下摇动玻片使抗原与被检血清均匀混合，1-3分钟内观察絮状物，液体透明者为阳性。2?病毒性疾病由于各种病毒在不同组织中含毒量不同，所以必须要采取含病毒量最多的组织，并要求新鲜，如兔病毒性出血症含毒量最多者是肝组织，水疱性口炎应采水疱液、水疱皮为被检材料。病毒的分离培养：用被检材料接种于新鲜琼脂培养基或血清血红素培养基，结果均为阴性者则将被检材料磨细或将液体材料用无菌生理盐水（PH7.2左右）、磷酸盐缓冲液作1：10稀释用6号玻璃滤器过滤的滤液即可作为接种材料，同时在接种液中加入青、链霉素（每毫升1000单位）。接种：根据接种材料可以分为下面三种方式：鸡胚接种：取9-10日龄的鸡胚，每胚绒尿腔接种0.2毫升，一般在接种后48-72小时内死亡。组织细胞接种：用各种动物组织的原代细胞或传代细胞接种，病毒能在细胞上繁殖，同时能使细胞产生病变。动物接种：通常用小白鼠、豚鼠和家兔接种病料。有的接种家兔一般皮下、肌肉或腹腔注射0.5毫升，有的用豚鼠皮内接种，如水疱性口炎。（3）病毒的鉴定：分离得到的病毒材料要以电子显微镜检查、血清学试验即可确认，进一步还需做理化和生物学特性鉴定。（4）血清中和试验：在被检病料上清液中加入等量该病标准高免血清，混匀后于37℃温箱作用30分钟；对照组用生理盐水代替血清。两组材料分别接种易感动物，一般观察7天。如果血清组获保护，而对照组发病死亡即可确诊。（5）兔疫学诊断：是一种重要的诊断技术，这些方法具有灵敏、快速、简易、准确的特点，用于传染病的诊断，大大地提高了诊断水平，至今应用已十分广泛。在动物传染病的免疫学检验中，除凝集反应、沉淀反应、补体结合反应；中和反应等血清学检验方法外，先后又研究出兔疫扩散、变态反应、萤光抗体技术、酶标记技术、单克隆抗体技术等属于免疫学诊断的范畴。