一、做好发情鉴定1．外部性行为发情母牛，兴奋不安，鸣叫持续几小时到一天左右，阴门肿胀，内壁潮红，有透明液体排出，发情初期企图爬跨其他牛，发情旺期接受爬跨，发情末期拒绝爬跨。2．直肠检查母牛发情的实质是卵巢上有卵泡发育，并且有一个成熟的卵子排出，通过直肠检查可作出判断。发情母牛卵巢上的卵泡随发情旺期的到来，卵泡壁由厚变薄，使卵泡质地由硬变软，有波动感，最后破裂，释放卵子，并于排卵处形成一凹陷，后形成黄体。发情母牛子宫内膜增生充血，触摸时，子宫卷曲收缩，质地变硬，呈“勃起”状，体积增大。二、严格执行冻配操作规程，实行无菌作业1．冻配用的一切器械使用前必须进行高湿灭菌消毒，用后先用清水，再用蒸馏水清洗后，放入专用器械箱内保存备用。2．检验室和配种室应常洒消毒液和清水，保持清洁卫生。3．配种员在输精前，应将指甲剪净、磨平，手臂用75%的酒精消毒，并涂以稀释液或生理盐水作润滑剂。4．待配母牛的外阴部先用清洗液清洗，再用酒精棉球擦试消毒或用1%高锰酸钾溶液冲洗消毒。三、重视保精，快速解冻与镜检1．根据液氮罐的性能要求，定期添加液氮，罐内盛装冻精的提筒不能露在液氮面外。2．取精时，尽可能用长镊子，不要将提筒或纱布袋提到临界线以上处(罐顶10厘米左右)。3．从液氮中取出细管冻精时，要轻轻甩1下～2下，将塑料细管的棉塞端放入35℃～40℃的温水中，把封口端留在水外1厘米～1.3厘米处，待管内精液融化一半时，立即取出备用。4．解冻后的精液镜检时，精子的活力不低于0.3的方可用于输精，这样才能保证正常受精。5．解冻后的精液应立即输配，不宜停放时间过长，应做到现解冻现输精。四、适时输精母黄牛正常排卵是在发情结束后的6～12小时，精子在母牛生殖道的存活时间为12～20小时，且还需要4～6小时的获能过程，才能与卵子结合受精，精子15分钟就会达到输卵管受精部位，因此，让精子早于卵子到达输卵管受精部位是提高受胎率的先决条件。1．适宜的输精时间是在母牛发情后期。此时母牛精神平稳，外阴部肿胀消失，阴道不再流出透明液体。直肠检查，卵泡胀大，表面紧张，有一触即破之感，此时为最佳输精时机。2．适宜的输精部位是在过子宫颈内口1厘米处即子宫体甚部，过浅易导致精液倒流，过深易损伤子宫内粘膜。3．适宜的输精方法直肠把握子宫颈输精法。将母牛保定，左手插入母牛直肠轻轻握住子宫颈后端，右手将输精枪自阴门向斜上方缓慢插入5～10厘米(以避开尿道口)，再改为平插送到子宫颈口，缓慢越过子宫颈管中的皱壁轮，到达子宫颈基部，慢慢注入精液后缓慢抽出输精枪。4．适宜的输精次数以1～2次为宜。可在发情母牛发情高潮后8～12小时进行第一次输精，隔8～12小时再进行第二次输精，这样可弥补判定适宜输精时间的误差。